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CellMax血清热灭活方法


何谓热灭活?

一般是以 56℃,30 分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。


我需要灭活血清吗?

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多, 这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在 37C 环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

因此若非必须,可以不需要做热处理这一步。


热灭活过程

将融化的血清放在 56 摄氏度直接水浴 30min


正确的方法

将融化的血清和盛有相同体积的水的烧杯同时放在 56 摄氏度中水浴,当烧杯中的温度计及指示达到 56 摄氏度时开始计时,30min 后灭活结束,整个过程中需要随时摇晃混匀