|
实验准备：10ml注射器活塞、70um细胞筛网或尼龙网、50ml（或35mm培养皿）和15ml离心管、细胞计数板、移液管、加样枪、水平离心机（带g，能调为Break off, 能调温度）、无菌刀片、无菌剪刀和镊子、75%的乙醇、生理盐水、DMEM、PBS 或RPMI-1640液实验步骤：1.断颈处死小鼠，浸泡于75%的乙醇中，10min；2.在超净台中取出小鼠脾脏（无菌操作）；3.将70um... 工具/原料活体小鼠（6-8周龄正常小鼠）小鼠解剖器具PBS溶液或HBSS加2%FBS推荐培养基：EasySep buffer（20144）或PBS加2%FBS加1mM的EDTA细胞筛（70um）培养皿、注射器细胞培养瓶、离心管常用移液管及移液枪方法/步骤1:颈椎脱臼法处死小鼠，75%乙醇浸泡5分钟，取出小鼠置于无菌操作台上，左腹侧朝上。解剖小鼠腹部，扒开内脏，可看到如图所示的长约3-4厘米呈... 生物学重复：指对同一个处理组中独立来源的多个样本分别进行独立测定分析，是整个实验的完全重复，如将具有同一基因型的多个细胞株进行独立地测定。由于遗传和环境等因素的影响会引起有机体的个体差异，因此需要采用生物重复的实验设计方法来消除该差异。技术重复：指对同一样本进行重复地检测分析，例如同一份细胞中抽提的蛋白质进行三次质谱检测，或者对同一RNA-seq样本测序3次。与生物学重复相比，技术重复的测量... 康宁 Matrigel matrix 的组成 康宁 Matrigel matrix 是从富含胞外基质蛋白的 EHS 小鼠肿瘤中提取的基底膜基质，其中含有约 60%层粘连蛋白、30% IV 胶原和 8%的巢蛋白。康宁 Matrigel matrix 还含有基底膜聚糖、TGF-ß、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、组织纤溶酶原及其他生长因子。融化康宁 Matrigel matrix 需要多长时间？... 重组蛋白的产品选择中为特定应用选择合适的表达系统是实验成功的关键。定制蛋白在选择表达系统时，蛋白质溶解度、功能、纯化速度和产量通常是最重要的考虑因素。此外，每种系统均有其各自的优势和局限性，在选择表达系统时必须考虑。现分享4种常用的表达系统：哺乳动物、昆虫、酵母、细菌。基于哺乳动物细胞的蛋白质表达哺乳动物宿主系统是适用于生成具有最天然结构和活性的哺乳动物蛋白的首选表达平台。哺乳动物表达系统可... 实验标本的采集/处理和保存一 血清1 采血后室温静置20min或更长时间至血清析出。2 将采集的血液用离心机4℃，2000rpm离心15min左右，将离心好的匀浆小心收集上清，弃下面沉淀。3 取上清并分装保存备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。大部分检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的测定中，溶血标... |