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蛋白芯片

蛋白芯片是一种高通量监测系统,通过靶分子和捕捉分子相互作用来监测蛋白分子之间的相互作用。捕获分子一般都预固定在芯片表面,由于抗体的高度特异性和与抗原强结合特性所以被广泛的用做捕获分子。

ELISA一直都是检测蛋白含量最经典的方法,但是需要检测多个样本多个因子时,传统的ELISA显得力不从心,蛋白芯片则实现了多样本多因子检测,属于高通量的蛋白检测方式。现在用到比较多的是固相和液相蛋白芯片,虽然都是蛋白芯片,都能从少量样本中一次性检测多个因子,但是实验原理还是有差异,适用情况也有所不同。


固相蛋白芯片

将大量不同的蛋白质有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。利用蛋白质分子间特异性结合的原理,实现对生物蛋白质分子精准、快速、高通量的检测。

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Raybiotech固相蛋白芯片的载体有膜和玻璃两种形式,定量和半定量两种检测分析方式,检测方式主要是双抗夹心法和标记法。可以对多种液质生物样本进行检测。


固相蛋白芯片的优点是:

1、高密度:每张芯片同一样品可同时检测多达数百种指标;

2、高通量:每天可完成多至上千样品的测试;

3、微型化:节省样品和试剂,实验空间小;

4、是蛋白质组学的工具,可用于分析反应模式;

5、高灵敏,高特异性和高重复性。


蛋白芯片可以检测多个种属,多种指标,可以自行定制专属产品:

Human(1000个定量指标)

Mouse(200个定量指标)

Rat (67个定量指标)

Monkey(10个定量指标)

Pig (40个定量指标)

QAC-CYT-1 -Canine (dog) Cytokine Array  (犬定量抗体芯片)

QAB-CYT-1 Bovine (cow) Cytokine Array  (牛定量抗体芯片)

QAL-CYT-1 Rabbit Cytokine Array (兔子定量抗体芯片)

QAF-CYT-1 Feline (cat) Cytokine Array  (猫定量抗体芯片)

QAE-CYT-1-Equine (horse) Cytokine Array  (马定量抗体芯片)

QAO-CYT-1-Ovine Cytokine Array Q1 (羊定量抗体芯片)


对于不同的分析物类型,Raybiotech也有一定的分类和推荐,例如凋亡因子类,肥胖因子类,趋化因子类等都有相关的已成型产品,无需自己再搭配定制。当然也可以用Raybiotech芯片产品检测部分疾病,如哮喘,高血压,癌症等等。针对芯片结果的提取,Raybiotech有专门的芯片扫描仪。


Raybiotech固相蛋白芯片中主要是玻璃芯片,每张玻片最多可检测16个样本,多个指标,所以raybiotech芯片适合样本数量不多,检测指标较多的实验。


液相蛋白芯片

由许多不同的小球体为主要基质构成,每种小球体上固定有不同的探针分子,将这些小球体悬浮于一个液相体系中,就构成了一个液相蛋白质芯片系统,利用这个系统,可以对同一个样品中的多个不同的分子同时进行检测,这种检测技术称之为xMAP(flexible Multi-Analyte Profiling) 技术。现在的液相蛋白芯片基本都是这个原理。

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R&D Luminex是使用带有颜色编码的聚苯乙烯微球或超顺磁微球,这些微球表面包被了针对目标物的特异性抗体。当这些预包被的微球与待检样本预混孵育时,目标物被微球捕获后,被用生物素标记的特异性检测抗体混合物识别,加入链霉亲和素-PE荧光素底物后发光并进行检测。微球被两种不同染料比例染成100种颜色,每种颜色微球包被上检测特定蛋白的抗体,与样本孵育后,微球上抓住的抗原量与荧光成正比。每个孔可同时放置多种颜色微球,即可检测多种指标,达到高通量检测的目的。


R&D Luminex多因子高通量检测可以一次实验实现多个样本或同一个样本中的多个因子进行同时检测,都是进行定量检测。可对细胞上清,血清,血浆,体液等样品进行检测。试剂盒有两种形式可供选择:聚苯乙烯微球或磁性微球。


液相蛋白芯片具有节省样本量,节省实验时间,节省科研经费,最大程度减小实验间误差等特点。

R&D的Luminex相较于其他液相蛋白芯片而言,能检测的因子数目更多一些:

Human (500+)

Mouse (300+)

Rat (150+)


液相芯片也有分析物类型和疾病研究的归类。对于芯片数据的提取,聚苯乙烯微球可用于:Luminex100™,Luminex 200™,或Bio-Rad® Bio-Plex®双激光分析仪。磁性微球可用于:Luminex MAGPIX®,Luminex 100™,Luminex 200™,或Bio-Rad® Bio-Plex®分析仪。


R&D的Luminex液相芯片为96孔板,与ELISA类似,所以对于样本数量较多,多个指标的检测实验更为合适。

相较于传统的ELISA检测方式,蛋白芯片在少量样本,一次实验,获取大量实验数据上有明显的优势。对于样本比较少而且珍贵,检测指标较多的研究,蛋白芯片是首选。当然选择固相还是液相芯片,需要考虑到实际的实验设计。如果需要了解更多芯片相关的信息,以及定制专属蛋白芯片,可进入相应网站查询:


//www.raybiotech.com/custom-sandwich-based-antibody-arrays/

//www.rndsystems.com/cn/products/luminex-assays